Cytométrie en flux spectrale et tri cellulaire haute résolution
PRECYM est équipée d’un cytomètre en flux trieur spectral Cytek Aurora CS, permettant l’analyse multiparamétrique à très haute dimension ainsi que le tri cellulaire sur la base de signatures spectrales complexes.
Le système repose sur une architecture à 5 lasers spatialement séparés, garantissant une excitation séquentielle optimisée et limitant les interférences spectrales :
UV : 355 nm (20 mW)
Violet : 405 nm (100 mW)
Bleu : 488 nm (50 mW)
Jaune-Vert : 561 nm (50 mW)
Rouge : 640 nm (80 mW)
La détection est assurée par 64 photodiodes à avalanche (APD) couvrant un spectre étendu (365–829 nm), organisées en modules spectraux :
UV : 16 canaux (UV1–UV16 ; 365–829 nm)
Violet : 16 canaux (V1–V16 ; 420–829 nm)
Bleu : 14 canaux (B1–B14 ; 498–829 nm)
Jaune-Vert : 10 canaux (YG1–YG10 ; 567–829 nm)
Rouge : 8 canaux (R1–R8 ; 652–829 nm)
Les paramètres de diffusion incluent FSC-Bleu, SSC-Bleu et SSC-Violet, ce dernier améliorant significativement la détection des particules submicroniques.
L’ensemble permet une acquisition exhaustive des signatures spectrales complètes pour chaque événement, condition essentielle à l’analyse de panels fortement multiplexés et à la discrimination fine de populations biologiques complexes.
| Paramètre | Spécification |
|---|---|
| Principe de mesure | Cytométrie spectrale avec décomposition par unmixing spectral complet |
| Gestion des lasers | Lasers spatialement séparés dans le temps avec ajustement automatique du laser delay lors des contrôles qualité quotidiens |
| Sensibilité instrumentale | Lasers à tête plate + architecture APD optimisée (CWDM) permettant une détection accrue des faibles signaux et des petites particules |
| Architecture des détecteurs | Jusqu’à 16 détecteurs APD par module spectral, directement couplés à chaque source laser |
| Traitement du signal | Déconvolution spectrale en temps réel pendant l’acquisition et le tri via SpectroFlo |
| Dynamique de mesure | Résolution numérique 22 bits, couvrant 6,5 décades logarithmiques |
| Autofluorescence | Modélisation et extraction de une ou plusieurs composantes d’autofluorescence traitées comme paramètres indépendants |
| Stratégies de tri | Tri basé sur données raw ou données unmixed |
| Format des données | Export en standard FCS 3.1 |
| Débit d’acquisition | Jusqu’à 25 000 événements/seconde |